АТ к цитоплазме нейтрофилов
В организме больного человека при ряде аутоиммунных заболеваний образуются специфичные антитела к антигенам, распределенным в цитоплазме белых клеток крови — в нейтрофилах. Эти, так называемые, антинейтрофильные цитоплазматические антитела (сокращенно АНЦА) сначала были выявлены и описаны при гранулематозных воспалительных заболеваниях стенок кровеносных сосудов.
Мишенью аутоантител являются белковые и ферментативные комплексы, которые обладают бактерицидными и микробицидными свойствами, и находятся в азурофильных гранулах нейтрофилов: протеиназа-3, лизоцим, эластаза, миелопероксидаза, катепсин G, лактоферрин и белок BPI. В ходе аутоиммуннной реакции происходит активация нейтрофилов и их дегрануляция. Они начинают вырабатывать свободные радикалы, повреждающие эндотелиальные клетки сосудов крови.
Для исследования проводится забор венозной крови пациента, которая для получения сыворотки, помещается в пробирку с разделительным гелем. Перед анализом не требуется специальной подготовки. Единственным условием является взятие анализа натощак, или после употребления пищи должно пройти более четырех часов.
Для определения наличия антител к цитоплазме нейтрофилов применяется метод непрямой иммунофлюоресценции, при котором используются здоровые донорские нейтрофилы, фиксированные этанолом. При положительной реакции (присутствие антител) проводится идентификационный анализ, при котором используются очищенные антигены. В ходе проводимого исследования выявляются два основных вида антител с разными видами флюоресценции (свечение), обусловленными различной антигенной направленностью: ц-АНЦА — цитоплазматическая и п-АНЦА - перинуклеарная.
При ц-АНЦА флюоресценции наблюдается свечение гранул нейтрофилов, которые распределены равномерно по всей поверхности цитоплазмы клетки. Это указывает на наличие антител к миелобластину (протеиназа-3 лизосомальная).
При п-АНЦА флюоресценции, свечение локализуется вокруг клеточного ядра, оставляя его неокрашенным. В этом случае имеются в наличии антитела, мишенью которых, являются антигенные комплексы: фермент миелопероксидаза, а также катепсин G, лизоцин, лактоферрин и эластаза.
Кроме основных видов свечения бывают атипичные типы флюоресценции.
Анализ проводится для выявления аутоиммунных васкулитов при гранулематозе Вегенера, узелковом периартериите, при синдромах Гудпасчера и Чарга–Стросса, при системной красной волчанке, микроскопическом полиангиите.
Положительный тест на антитела к цитоплазме нейтрофилов наблюдается и при быстро прогрессирующем идиопатическом гломерулонефрите, и при язвенном колите. Имеется небольшой процент (6%) выявления антител у практически здоровых людей.
Мишенью аутоантител являются белковые и ферментативные комплексы, которые обладают бактерицидными и микробицидными свойствами, и находятся в азурофильных гранулах нейтрофилов: протеиназа-3, лизоцим, эластаза, миелопероксидаза, катепсин G, лактоферрин и белок BPI. В ходе аутоиммуннной реакции происходит активация нейтрофилов и их дегрануляция. Они начинают вырабатывать свободные радикалы, повреждающие эндотелиальные клетки сосудов крови.
Подготовка к исследованию
Для исследования проводится забор венозной крови пациента, которая для получения сыворотки, помещается в пробирку с разделительным гелем. Перед анализом не требуется специальной подготовки. Единственным условием является взятие анализа натощак, или после употребления пищи должно пройти более четырех часов.
Проведение теста
Для определения наличия антител к цитоплазме нейтрофилов применяется метод непрямой иммунофлюоресценции, при котором используются здоровые донорские нейтрофилы, фиксированные этанолом. При положительной реакции (присутствие антител) проводится идентификационный анализ, при котором используются очищенные антигены. В ходе проводимого исследования выявляются два основных вида антител с разными видами флюоресценции (свечение), обусловленными различной антигенной направленностью: ц-АНЦА — цитоплазматическая и п-АНЦА - перинуклеарная.
Дифференциация антител
При ц-АНЦА флюоресценции наблюдается свечение гранул нейтрофилов, которые распределены равномерно по всей поверхности цитоплазмы клетки. Это указывает на наличие антител к миелобластину (протеиназа-3 лизосомальная).
При п-АНЦА флюоресценции, свечение локализуется вокруг клеточного ядра, оставляя его неокрашенным. В этом случае имеются в наличии антитела, мишенью которых, являются антигенные комплексы: фермент миелопероксидаза, а также катепсин G, лизоцин, лактоферрин и эластаза.
Кроме основных видов свечения бывают атипичные типы флюоресценции.
Значение метода определения АТ к цитоплазме нейтрофилов
Анализ проводится для выявления аутоиммунных васкулитов при гранулематозе Вегенера, узелковом периартериите, при синдромах Гудпасчера и Чарга–Стросса, при системной красной волчанке, микроскопическом полиангиите.
Положительный тест на антитела к цитоплазме нейтрофилов наблюдается и при быстро прогрессирующем идиопатическом гломерулонефрите, и при язвенном колите. Имеется небольшой процент (6%) выявления антител у практически здоровых людей.