Ген EFGR в сыворотке крови

В наше время молекулярно-генетические исследования стали неотъемлемой частью диагностического процесса и выбора тактики лечения при онкологических заболеваниях. Применение недавно открытых таргентных препаратов, действующих непосредственно на опухолевые клетки, требует идентификации генных нарушений, которые обусловливают эффект от проводимой химиотерапии. Такими препаратами являются, например, эрлотиниб и генифитиб (ингибиторы ТК EFGR) при лечении немелкоклеточного рака легких используются при определении в опухоли соматических мутаций в гене EFGR. К сожалению, такие мутации выявляются всего лишь в 10-ти% случаев.

Анализ рекомендован пациентам с диагнозом немелкоклеточный рак легких, для определения возможно ли лечение с употреблением таргентных препаратов.

Проводится такой анализ с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени. Для проведения такого исследования необходим специальный прибор – стандартный автоматический амплификатор, который совмещен с флюориметром. Праймеры, используемые для анализа, метят тремя разными флюоресцентными красителями (четвертый краситель используют для отмечания стандартного молекулярного веса). Использование флюоресцентной ПЦР в реальном времени позволяет провести анализ сразу трех образцов на одной дорожке, эффективность исследования при этом очень повышается. Определение продуктов реакции проходит прямо через стенки закрытой пробирки.

• Непосредственно ткань опухоли, которая была заморожена сразу после биопсии или оперативного вмешательства
• Срез ткани опухоли, зафиксированный в парафине
• Кровь из вены, желательно чтобы забор крови проводился непосредственно перед анализом.

1. На первом этапе из материала выделяют ДНК, свободную от примесей и клеточных фракций.

2. Второй этап проводят в термостате, где происходит накопление отдельных фрагментов ДНК

3. На третьем этапе с помощью флуоресцентного зонда происходит определение последовательности ДНК матрицы.

Анализ позволяет применять дорогостоящие таргентные препараты у тех пациентов, для которых они будут наиболее эффективны.