ПЦР диагностика инфекций. Mycobacterium tuberculosiss (Суставная жидкость).
Среди всех используемых методов диагностики туберкулеза ведущее место по скорости, разнообразию биологического материала, на котором можно проводить диагностику, высокоспецифичности, а также достоверности занимает ПЦР-диагностика.
За разработку этого метода, сделавшего революцию в диагностике инфекций, его автор, Кэри Мюлис получил в 1993 году Нобелевскую премию.
Метод позволяет обнаружить в суставной жидкости даже несколько отдельных бактерий – возбудителей туберкулёза. В геноме возбудителя заранее выбран специфичный для туберкулёзной палочки участок-маркер, который обнаруживается специальными ферментами. Время проведения анализа – 4-5 часов.
ПЦР-диагностика Mycobacterium tuberculosiss в суставной жидкости.
Диагностика туберкулёза осуществляется путём определения маркерного участка, специфичного для данной бактерии с биоптате сустава пациента. Специфичность определения возбудителя составляет 98 %, а чувствительность – не менее 100 копий ДНК в 5 микролитрах выделенной пробы ДНК.
Метод позволяет ставить диагноз при диссеминированных и ограниченных формах заболеваний, когда другие методы диагностики применяться не могут из-за их недостаточной чувствительности, а микробиологические методы дают отрицательный результат.
Процедура взятия суставной жидкости для проведения анализа.
Отличительной чертой туберкулёза костей и суставов является малая концентрация возбудителя в биологических жидкостях, доступных для анализа.
Сложностью ПЦР диагностики биоптатов является необходимость применения специальных методов для разрушения клеток биоптата и выделения ДНК.
Существуют правила подготовки пациента к забору необходимой суставной жидкости для ПЦР-диагностики туберкулёза.
Для анализа используют гной натёчных абсцессов, содержимое свищей и хирургический материал после операций.
Во избежание перекрёстного загрязнения проб помещения для забора образцов обрабатываются ультрафиолетовыми лампами, а все поверхности – хлорсодержащими асептиками.
Лучше всего проводить анализ в период обострения заболевания. Приём лекарственных препаратов необходимо прекратить за 3-4 дня до проведения анализа. Контроль эффективности проведенного лечения лучше осуществлять через две-три недели после его завершения.
Необходимо чтобы объём пробы не был избыточным, а также забор суставной жидкости должен выполняться так, чтобы в пробу не попадал биологический материал из других тканей и органов.
Для проведения данного анализа необходимо применять только специальную одноразовую посуду и инструмент. После проведения анализа всю использованную посуду уничтожают при помощи автоклавирования.